篇一 生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告比較過氧化氫酶和fe3+的催化效率250字
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1.初步學(xué)會(huì)探索酶的催化效率的方法。
2.探索過氧化氫酶和Fe3+催化效率的高低。
二、實(shí)驗(yàn)原理
新鮮的豬肝中含有過氧化氫酶，F(xiàn)e3+是一種無機(jī)催化劑，它們都可以催化過氧化氫分解
成水和氧
三、材料用具
新鮮的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的豬肝研磨液、滴管、試管、火柴、試管架、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.5%的氯化鐵溶液、體積分?jǐn)?shù)為3%的過氧化氫溶液。
四、實(shí)驗(yàn)過程（見書Ｐ30）您正瀏覽的文章由()整理，版權(quán)歸原作者、原出處所有。
五、討論
實(shí)驗(yàn)時(shí)為什么要選用新鮮的豬肝？在滴入豬肝研磨液和氯化鐵溶液時(shí)能否公用一個(gè)吸管？為什么？
篇二 生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告觀察植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離與復(fù)原500字
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1. 初步學(xué)會(huì)觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。
2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗(yàn)原理
當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí)，細(xì)胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶 液中，使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大，當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí)，原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開，也就是分升了質(zhì)壁分離當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí)，外界溶液中的水分就透過原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液中，整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài)，使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗(yàn)過程（見書Ｐ60）
物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板
五、討論
1．如果將洋蔥表皮細(xì)胞浸潤在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象？
2．當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí)，紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象？為什么？
3．畫一個(gè)細(xì)胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過0.3g/ml蔗糖溶液處理，再經(jīng)過清水處理的細(xì)胞變化的一系列模式圖。
篇三 醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理自查報(bào)告1050字
醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室安全管理自查報(bào)告范文
為加強(qiáng)醫(yī)院病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作，確保醫(yī)院平安目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)，我院檢驗(yàn)科根據(jù)____省《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的相關(guān)內(nèi)容，對(duì)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室安全管理工作進(jìn)行了自查，對(duì)涉及病原微生物菌(毒)種及樣本的人員進(jìn)行了培訓(xùn)，提高他們生物安全的意識(shí)，掌握必要的生物安全知識(shí)。
一、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作、各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況
醫(yī)院檢驗(yàn)科根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行學(xué)習(xí)，并定期對(duì)有關(guān)生物安全各項(xiàng)規(guī)章制度的運(yùn)行情況進(jìn)行檢查，對(duì)存在的問題及時(shí)進(jìn)行整改。實(shí)驗(yàn)室所從事的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)均嚴(yán)格遵守有關(guān)的國家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程，并指定專人監(jiān)督檢查實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程的落實(shí)情況。同時(shí)，對(duì)檢查情況進(jìn)行詳細(xì)記錄，定期召開會(huì)議討論工作中發(fā)現(xiàn)的問題，及時(shí)糾正。
二、病原微生物菌(毒)種的管理及運(yùn)輸
因各方面條件限制我院現(xiàn)不能開展病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物的檢查，根據(jù)通知要求積極組織相關(guān)人員主要學(xué)習(xí)了：病原微生物實(shí)驗(yàn)室菌(毒)種的'管理嚴(yán)格登記制度，收到菌(毒)種后立即進(jìn)行編號(hào)登記，詳細(xì)記錄菌(毒)種的名稱、來源、特性、用途、批號(hào)、傳代日期、數(shù)量。在菌(毒)種的管理，安全保衛(wèi)制度，安全保衛(wèi)措施，保管過程中，傳代、分發(fā)及使用，均應(yīng)及時(shí)登記，定期核對(duì)庫存數(shù)量。菌(毒)種在進(jìn)行銷毀時(shí)，滅菌指示標(biāo)志，滅菌效果，同時(shí)做好銷毀登記等內(nèi)容。
三、實(shí)驗(yàn)室生物安全突發(fā)事件的處理工作
在此次自檢中，我院實(shí)驗(yàn)室對(duì)以前制訂的處置意外事件的應(yīng)急指揮和處置體系，進(jìn)一步進(jìn)行了修訂，使之能滿足實(shí)際工作的需要。
針對(duì)當(dāng)發(fā)生自然災(zāi)害(如地震、水災(zāi)等)或設(shè)施出現(xiàn)故障時(shí)，我們制定了可能遇到的緊急情況及其處理原則。
同時(shí)規(guī)范了菌(毒)種外溢在臺(tái)面、地面和其他表面的的處理原則、皮膚刺傷(破損)的處理原則、離心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報(bào)告制度。
在實(shí)驗(yàn)室的顯著位置張貼了實(shí)驗(yàn)負(fù)責(zé)人、實(shí)驗(yàn)室工作人員、消防、醫(yī)院、公安、工程技術(shù)人員、水、電氣維修部門電話。
四、提高意識(shí)，加強(qiáng)學(xué)習(xí)
組織檢驗(yàn)人員對(duì)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》進(jìn)行全面系統(tǒng)的學(xué)習(xí)，同時(shí)加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)入制度的管理，標(biāo)明實(shí)驗(yàn)室類型、負(fù)責(zé)人及其聯(lián)絡(luò)方式。加強(qiáng)了個(gè)人安全防護(hù)，并要求檢驗(yàn)人員嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)。
通過這次對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作自查，提高了全體檢驗(yàn)人員對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作重要性的認(rèn)識(shí)，加強(qiáng)管理，采取有效措施，確保實(shí)驗(yàn)室工作安全。
篇四 生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告4450字
關(guān)于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
劉希偉201100140041分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
質(zhì)粒dna的提取、純化及檢測
姓名：___學(xué)號(hào)：2011001400__年級(jí)：20__級(jí)生物基地班 實(shí)驗(yàn)日期：2023年9月16日—30日組別：6組 同組者：__
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒dna的原理和方法。
2、學(xué)習(xí)并掌握凝膠電泳進(jìn)行dna的分離純化的實(shí)驗(yàn)原理。
3、學(xué)習(xí)并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學(xué)習(xí)并掌握凝膠中dna的分離純化方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
1、質(zhì)粒dna的制備方法
質(zhì)粒（plasmid）是獨(dú)立存在于染色體外、能自主復(fù)制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈dna分子，分布于細(xì)菌、放線菌、真菌以及一些動(dòng)植物細(xì)胞中，但在細(xì)菌細(xì)胞中含量最多。細(xì)菌質(zhì)粒大小介于1～200kb之間，是應(yīng)用最多的質(zhì)粒類群，在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)它們利用宿主細(xì)胞的復(fù)制機(jī)構(gòu)合成質(zhì)粒自身的dna。
質(zhì)粒dna的制備包括3個(gè)步驟：①培養(yǎng)細(xì)菌，使質(zhì)粒dna大量擴(kuò)增；②收集和裂解細(xì)菌；③分離和純化質(zhì)粒dna。主要方法包括：堿裂解法：0。2molnaoh+1%sds；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；sds裂解法：10%sds，一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)以及質(zhì)粒dna的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗(yàn)選擇堿裂解法提取質(zhì)粒dna。
2、質(zhì)粒dna的提取——堿變性提取法
在細(xì)菌細(xì)胞中，染色體dna和質(zhì)粒dna均被釋放出來，但是兩者變性與復(fù)性所依賴的溶ph值不同。在ph值高達(dá)12。0的堿性溶液中，染色體dna的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性；共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒dna的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補(bǔ)鏈不完全分離。因?yàn)樗鼈冊(cè)谕負(fù)鋵W(xué)上是相互纏繞的。當(dāng)用ph值4。6的kac（naac）高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒dna可恢復(fù)原來的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中；但染色體dna不能復(fù)性，而是與不穩(wěn)定的大分子rna、蛋白質(zhì)—sds復(fù)合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心，與復(fù)性的溶于溶液的質(zhì)粒dna分離。溶于上清液的質(zhì)粒dna，可用無水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于dna和rna性質(zhì)類似，乙醇沉淀
dna的同時(shí)，也伴隨著rna沉淀，可利用rnasea將rna降解。質(zhì)粒dna溶液中的rnasea以及一些可溶性蛋白，可通過酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質(zhì)粒dna。
3、凝膠電泳進(jìn)行dna分離純化
電泳（electrophoresis）是帶電物質(zhì)在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定ph條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會(huì)向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì)，它具有分子篩效應(yīng)。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會(huì)發(fā)生移動(dòng)，移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異，就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化dna的片段，是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中dna的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，eb）或sybr gold染色直接觀察到，甚至含量少至20pg的雙鏈dna在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話，這些分離的dna條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實(shí)驗(yàn)。
分子生物學(xué)中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構(gòu)型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高，長度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的dna都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行dna序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進(jìn)行電泳，并能容納較大的dna上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物，由β—d—吡喃半乳糖與3，6—脫水—l—吡喃半乳糖組成，相對(duì)分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬bp），小片段dna（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定dna的相對(duì)分子質(zhì)量，分離經(jīng)限制酶水解的dna的片段，進(jìn)一步純化dna等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負(fù)電荷，在電場中向正極移動(dòng)。dna在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素：樣品dna分子的大小、dna分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。
三、實(shí)驗(yàn)材料
1、實(shí)驗(yàn)儀器
培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管（eppendorf管）、高速離心機(jī)、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號(hào)槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號(hào)筆、手套等。
2、實(shí)驗(yàn)試劑
lb培養(yǎng)基，抗生素ap（氨芐青霉素），溶液ⅰ，溶液ⅱ，溶液ⅲ，rnasea母液，te緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（pci）混合液，預(yù)冷無水乙醇，tae電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（eb），dna相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物dna marker λ/hind ⅲ，5mol/l ph 5。2的醋酸鈉。
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)
配制lb液體培養(yǎng)基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配lb固體培養(yǎng)基；準(zhǔn)備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個(gè) ，將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。
2、菌體培養(yǎng)
在含有ap的lb平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒puc19的e。coli dh5單菌落，接種于20mllb液體培養(yǎng)基中進(jìn)行37℃振蕩過夜培養(yǎng)，培養(yǎng)基中加ap100ul
（100ug/ml），質(zhì)粒puc19具有ap抗性基因，使得帶有puc19的質(zhì)粒得以生長。 過夜培養(yǎng)后菌體量大，雜質(zhì)較多，然后用移液槍吸取過夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mllb液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中加入ap250ul，37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對(duì)數(shù)生長期后期，生長速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質(zhì)少，適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
（1）稱量空的50ml離心管的重量為14。331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒?jié)M，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細(xì)胞。
（2）向離心管中懸滴加入5ml冰預(yù)冷的溶液ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱重得14。437g，則菌體質(zhì)量為106mg。
（3）洗滌后每100mg菌體應(yīng)加入冰預(yù)冷的溶液ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會(huì)快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細(xì)胞提前破裂，防止dna受機(jī)械剪切力作用而降解。edta是ca2+和mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑，可抑制dnase的活性，抑制微生物的生長。tris—cl溶液提供適當(dāng)?shù)膒h。
（4） 按比例加入新配制的溶液ⅱ2ml（與溶液ⅰ對(duì)應(yīng)），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液ⅱ中的naoh使細(xì)胞膜發(fā)生了從bilayer（雙層膜）結(jié)構(gòu)向micelle（微囊）結(jié)構(gòu)的相變化導(dǎo)致細(xì)胞溶解。同時(shí)，強(qiáng)堿性使染色體dna、質(zhì)粒dna和蛋白質(zhì)變性；sds為下一步沉淀做鋪墊。
（5）按比例加入冰預(yù)冷的溶液ⅲ1。5ml（與溶液ⅰ、ⅱ對(duì)應(yīng)），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)sds復(fù)合物、細(xì)胞碎片和其他大分子成分。溶液ⅲ中的hac中和naoh，因?yàn)殚L時(shí)間的堿性條件會(huì)打斷基因組dna，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被pds共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒dna復(fù)性。反應(yīng)形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。
（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側(cè)，用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3mnaac混勻，加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會(huì)起任何化學(xué)反應(yīng)，對(duì)dna很安全，因此是理想的沉淀劑。 dna溶液是dna以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時(shí)，乙醇會(huì)奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易于聚合。在ph為8左右的溶液中，dna分子是帶負(fù)電荷的，加一定濃度的naac或nacl，易于互相聚合而形成dna鈉鹽沉淀。
（7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到dna沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。
（8）以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標(biāo)記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色，隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o色。所以為了完全溶解質(zhì)粒，要在離心管上標(biāo)記質(zhì)粒所在位置。
（9）將dna沉淀溶于1mlte緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個(gè)eppendorf管中。te是ph緩沖液，為dna提供穩(wěn)定的生理狀態(tài)，呈弱堿性，有利于保護(hù)堿基對(duì)。同時(shí)含有edta是二價(jià)陽離子的螯合劑，抑制dna酶作用。
4、質(zhì)粒純化
（1）eppendorf管中加入rnase a（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0。5—1h
（2）將上述的溶液平均分配到2個(gè)1。5ml的微量離心管中，每管0。5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的eppendorf管中。苯酚是經(jīng)tris飽和后的，顯黃色。苯
酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無色，在中間產(chǎn)生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質(zhì)。
（3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的eppendorf管中。苯酚是強(qiáng)的蛋白變性劑，但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì)影響dna的酶切，它本身易被氧化，會(huì)損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質(zhì)粒中的脂類，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現(xiàn)的泡沫，有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質(zhì)的存在。
（4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的eppendorf管中，得上清液400ul。
（5）向上清液中加入1/10體積的naac混勻，再加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。
（6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到dna沉淀，為白色。
（7）向dna沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。
（8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulte溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測
（1）稱取0。4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標(biāo)好液面位置，加入40ml的1×tae電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補(bǔ)充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。
（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×tae 電泳緩沖液，至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。
（3）電泳1h，觀察溴酚蘭的帶（藍(lán)色）的移動(dòng)。
（4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進(jìn)eb溶液中進(jìn)行染色，完全浸泡約5min。
（5）凝膠成像儀觀察。
五、注意事項(xiàng)
（1）滴加溶液ii時(shí)，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動(dòng)作要快，因?yàn)閺?qiáng)堿在溶液中停留時(shí)間不能過長，否則會(huì)破壞質(zhì)粒dna。
（2）加入溶液iii后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液iii中和強(qiáng)堿使質(zhì)粒復(fù)性，不可劇烈震蕩， 防止染色體dna斷裂，應(yīng)該上下顛倒離心管，使其混勻。
篇五 動(dòng)物微生物及免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的報(bào)告2800字
動(dòng)物微生物及免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的報(bào)告
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
（一）掌握一般培養(yǎng)基的制備原理及要求，掌握培養(yǎng)基酸堿度的測定，熟悉一
般培養(yǎng)基的制備過程和各種器皿滅菌方法。
（二）掌握細(xì)菌分離培養(yǎng)的基本要領(lǐng)和方法，掌握細(xì)菌抹片的制備方法和革蘭
氏染色法及油鏡的使用方法，并認(rèn)識(shí)革蘭氏染色的反應(yīng)特性。
（三）掌握學(xué)習(xí)用微生物學(xué)原理診斷疾病的一般方法及步驟。
二、實(shí)驗(yàn)用品
（一）器材
量筒、燒杯、電子天平、漏斗、三角燒瓶、空試劑瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、ph試紙、紗布、脫脂棉、天平、電爐、試劑瓶瓶塞、扎繩、放大鏡、包裝紙、洗耳球、酒精燈、載玻片、火柴、吸水紙、剪刀、記號(hào)筆、接種環(huán)、注射器、鑷子、鉗子、毫米尺、培養(yǎng)箱、水浴培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、油鏡
（二）試劑及材料
肘胨、蛋白胨、豬膽鹽、氯化鈉、瓊脂、乳糖、0.01%結(jié)晶紫水溶液、0.5%中性紅水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氫氧化鈉、鹽酸、牛血清、革蘭氏染色液、蒸餾水、小白鼠、病豬內(nèi)臟
三、實(shí)驗(yàn)步驟
（一）培養(yǎng)基的制備
（所有用到的器皿都已121℃高壓滅菌15~30min，傾注平板在無菌操作臺(tái)內(nèi)完成，并放在無菌操作臺(tái)內(nèi)）
1、麥康凱培養(yǎng)基
（1） 組成：蛋白胨17g、肘胨3g、豬膽鹽5g、氯化鈉5g、瓊脂17g、乳糖
10g、0.01%結(jié)晶紫水溶液10ml、0.5%中性紅水溶液5ml、蒸餾水1000ml
（2） 方法：將蛋白胨、肘胨、豬膽鹽和氯化鈉溶解于400ml蒸餾水中，調(diào)節(jié)
ph至7.2。將瓊脂加入600ml蒸餾水中，并加入乳糖，加熱熔化。將兩
液混合，分裝于燒瓶內(nèi)，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌
15~30min。待冷卻至50~ 55℃時(shí)，加入結(jié)晶紫和中性紅水溶液，搖勻后
傾注平板。
注：結(jié)晶紫和中性紅水溶液配好后需經(jīng)高壓滅菌。
2、血清平板
（1） 組成：營養(yǎng)瓊脂、牛血清
（2） 方法：將滅菌的營養(yǎng)瓊脂加熱熔化，冷卻至45~50℃時(shí)，加入牛血清，并
混勻，傾注平板。
注：不得將牛血清一并加入后再滅菌。
3、lb培養(yǎng)基
（1） 組成：胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化鈉10g、瓊脂15g
（2） 方法：在950ml蒸餾水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、瓊脂和氯化鈉，
調(diào)節(jié)ph至7.4，加熱熔化，分裝于瓶中，用紗布、扎繩等捆好后，121℃高壓滅菌15~30min。待冷卻至50~ 55℃時(shí)，傾注平板。
4、液體培養(yǎng)基（在lb培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，裝入大試劑瓶中，不加瓊脂，不分裝）
（二）病料取材
在病豬死亡后，首先用顯微鏡檢查其末梢血液膜片中是否有炭疽桿菌存在，未發(fā)現(xiàn)，則立即用消毒的器械對(duì)其進(jìn)行生理解剖，觀察其病理特征現(xiàn)象，取出病豬的十二指腸、胃、肝臟三處的組織物，并注意組織的完整性，用儲(chǔ)物袋密封保存。
（三）細(xì)菌粗培養(yǎng)
1、消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗(yàn)手套，再用消毒水對(duì)無菌操作臺(tái)內(nèi)桌面及用酒精燈外焰對(duì)待用器械進(jìn)行火焰滅菌。
2、接種
（1） 在無菌操作臺(tái)酒精燈旁打開用儲(chǔ)物袋密封保存的病料，先左手持鑷子右
手持剪刀，把病料剪出一個(gè)小口。
（2） 右手持滅過菌的接種環(huán)，左手持平板，并用拇指、食指及中指將平皿揭
開約20左右，然后將接種環(huán)前端插入小口旋轉(zhuǎn)一下后，再用劃線接種的方法接種到一個(gè)血清平板上。
（3） 用記號(hào)筆在平板底部作好日期、操作人員、部位等標(biāo)記，并將平板倒放。
以此方法，分別接種十二指腸、胃粘膜、肝臟于血清平板上，各接種2個(gè)血清平板。
3、培養(yǎng)：將接種好的血清平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中，反向培養(yǎng)24小時(shí)。 注：劃線接種時(shí)盡量劃開，以保證長出單個(gè)菌落，且劃線時(shí)接種環(huán)應(yīng)盡量傾斜，以免劃破培養(yǎng)基（后同）；待接種完畢后熄滅無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈，關(guān)閉好無菌操作臺(tái)窗口，打開無菌操作臺(tái)內(nèi)的紫外燈。 。
（四）細(xì)菌純培養(yǎng)
1、菌落特征判斷
待粗培養(yǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)24小時(shí)后，取出用放大鏡觀察記錄單個(gè)小菌落的形態(tài)特征并用實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙記錄好，并在平板底部上做好觀察標(biāo)記，其形態(tài)特征包括大小、形狀、菌落邊緣、表面構(gòu)造、隆起度、濕潤度、透明度、顏色等。
2、取單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢
（1） 取干凈的載玻片，用記號(hào)筆在其一面做好正反面標(biāo)記，再在載玻片另一
面中央滴上一小滴蒸餾水。
（2） 將接種環(huán)在火焰上滅菌，待冷卻后，在酒精燈旁從標(biāo)記的單個(gè)小菌落中
取少許細(xì)菌置于蒸餾水中混勻（同時(shí)蓋好平板倒扣置于一旁），用接種環(huán)涂成直徑約1.5cm的菌膜，再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細(xì)菌，待冷卻進(jìn)行染色。
（3） 先滴加草酸結(jié)晶紫溶液染色1~2min，再水洗；然后滴加革蘭氏碘液溶液
染色1~2min，再水洗；隨后滴加95%的酒精脫色30~60s，再水洗；最后滴加稀釋的品紅進(jìn)行復(fù)染30~60s，再水洗；待干燥或吸水紙吸干后鏡檢。
（4） 將干燥的載玻片放在1000倍油鏡下，滴加一滴松柏油進(jìn)行鏡檢，觀察其
形態(tài)特征，判斷細(xì)菌的種屬。
3、細(xì)菌接種培養(yǎng)
（1） 消毒滅菌：操作人員先用消毒水清洗手或戴好實(shí)驗(yàn)手套，再用消毒水對(duì)
無菌操作臺(tái)內(nèi)桌面及用酒精燈外焰對(duì)待用器械進(jìn)行火焰滅菌。
（2） 接種：右手持滅過菌的接種環(huán)，左手持平板，并用拇指、食指及中指將
平皿揭開約20左右，然后將接種環(huán)插入揭開的平板口內(nèi)蘸去一下鏡檢標(biāo)記的小菌落，再用劃線接種的方法接種到一個(gè)血清平板、lb平板或麥康凱平板上。并用記號(hào)筆在平板底部作好日期、操作人員、菌種、部位等標(biāo)記，將平板倒放。
（3） 將接種好的`平板倒扣放入37℃培養(yǎng)箱中，反向培養(yǎng)24小時(shí)。
注：油鏡用完后應(yīng)立即清理物鏡上的松柏油；劃線接種時(shí)盡量劃開，以保證長出單個(gè)菌落；待接種完畢后熄滅無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈，關(guān)閉好無菌操作臺(tái)窗口，打開無菌操作臺(tái)內(nèi)的紫外燈。 。
（五）菌液的制備
1、鏡檢：用革蘭氏染色法在1000倍油鏡下鏡檢，觀察并記錄是否為純培養(yǎng)的細(xì)菌。
2、分裝液體培養(yǎng)基：先對(duì)無菌操作臺(tái)及需要使用的器械進(jìn)行消毒滅菌，然后用鉗子揭開一個(gè)空試劑瓶，用傾倒的方法在酒精燈旁從液體培養(yǎng)基大試劑瓶中分裝于空試劑瓶內(nèi)，并立即蓋上液體培養(yǎng)基大試劑瓶瓶塞。
3、接種：右手持接種環(huán)，用火焰對(duì)其進(jìn)行滅菌，待冷卻后，取出純培養(yǎng)的平板，在無菌操作臺(tái)內(nèi)酒精燈旁，蘸去少許細(xì)菌，左手傾斜液體培養(yǎng)基，將接種環(huán)，伸入液體培養(yǎng)基內(nèi)攪動(dòng)，然后取出對(duì)接種火焰環(huán)滅菌，并用滅菌的包裝紙捆綁好后，用記號(hào)筆做好相應(yīng)標(biāo)記，置于一旁。
4、培養(yǎng)搖菌：將接種好的液體培養(yǎng)基置于水浴培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。 注：分裝一個(gè)培養(yǎng)基就接種一個(gè)培養(yǎng)基，不得全部分裝完后再一個(gè)一個(gè)接種。
（六）小鼠致病性實(shí)驗(yàn)
1、保定：選擇健康的青壯年小白鼠，先用右手抓住尾巴，旋轉(zhuǎn)數(shù)周讓其眩暈，然后用左手的拇指和食指捏住兩耳及頭部皮膚，并翻轉(zhuǎn)左手，使其頭部朝下，以達(dá)到內(nèi)臟前移的目的。
2、接種：先用酒精棉球蘸取酒精對(duì)注射部位擦洗消毒，再用注射器注射吸取0.2ml菌液注射于小白鼠腹腔中。
3、觀察：將接種的小白鼠放在適宜的環(huán)境下生活，并在鼠籠處用記號(hào)筆標(biāo)記好接種時(shí)間、菌種等。
4、再培養(yǎng)鑒定：待小白鼠死亡后，對(duì)其進(jìn)行解剖，觀察其內(nèi)臟病變情況，并取肝臟直接涂在相應(yīng)培養(yǎng)基上，在適宜條件下反向培養(yǎng)24小時(shí)后，取菌落細(xì)菌進(jìn)行鏡檢觀察判斷。
注：在注射小白鼠2小時(shí)候需要觀察小白鼠是否因注射時(shí)傷害到內(nèi)臟而死亡。
動(dòng)物微生物及免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的報(bào)告
篇六 醫(yī)院生物實(shí)驗(yàn)室安全自查報(bào)告900字
醫(yī)院生物實(shí)驗(yàn)室安全自查報(bào)告
國家根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對(duì)病原微生物的生物安全防護(hù)水平，并依照實(shí)驗(yàn)室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，將實(shí)驗(yàn)室分為一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)、四級(jí)。新建、改建、擴(kuò)建三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室或者生產(chǎn)、進(jìn)口移動(dòng)式三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)遵守下列規(guī)定：
（一）符合國家生物安全實(shí)驗(yàn)室體系規(guī)劃并依法履行有關(guān)審批手續(xù)。
（二）經(jīng)國務(wù)院科技主管部門審查同意。
（三）符合國家生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范。
（四）依照《______環(huán)境影響評(píng)價(jià)法》的規(guī)定進(jìn)行環(huán)境影響評(píng)價(jià)并經(jīng)環(huán)境保護(hù)主管部門審查批準(zhǔn)。
（五）生物安全防護(hù)級(jí)別與其擬從事的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)。
前款規(guī)定所稱國家生物安全實(shí)驗(yàn)室體系規(guī)劃，由國務(wù)院投資主管部門會(huì)同國務(wù)院有關(guān)部門制定。制定國家生物安全實(shí)驗(yàn)室體系規(guī)劃應(yīng)當(dāng)遵循總量控制、合理布局、資源共享的原則，并應(yīng)當(dāng)召開聽證會(huì)或者論證會(huì)，聽取公共衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)、投資管理和實(shí)驗(yàn)室管理等方面專家的意見。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)通過實(shí)驗(yàn)室國家認(rèn)可。
國務(wù)院認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理部門確定的認(rèn)可機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)依照實(shí)驗(yàn)室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)以及本條例的有關(guān)規(guī)定，對(duì)三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行認(rèn)可；實(shí)驗(yàn)室通過認(rèn)可的，頒發(fā)相應(yīng)級(jí)別的生物安全實(shí)驗(yàn)室證書。證書有效期為５年。一級(jí)、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，應(yīng)當(dāng)具備下列條件：
（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛿M從事的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)符合國務(wù)院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門的規(guī)定。
（二）通過實(shí)驗(yàn)室國家認(rèn)可。
（三）具有與擬從事的實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相適應(yīng)的工作人員。
（四）工程質(zhì)量經(jīng)建筑主管部門依法檢測驗(yàn)收合格。
國務(wù)院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門依照各自職責(zé)對(duì)三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室是否符合上述條件進(jìn)行審查；對(duì)符合條件的，發(fā)給從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的資格證書。
取得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資格證書的實(shí)驗(yàn)室，需要從事某種高致病性病原微生物或者疑似高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)的，應(yīng)當(dāng)依照國務(wù)院衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門的規(guī)定報(bào)省級(jí)以上人民政府衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門批準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)活動(dòng)結(jié)果以及工作情況應(yīng)當(dāng)向原批準(zhǔn)部門報(bào)告。
篇七 微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告1550字
微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板
實(shí)驗(yàn)室空氣微生物檢測
實(shí)驗(yàn)室環(huán)境微生物的檢測
班級(jí)：生物工程123 姓名：趙家熙 學(xué)號(hào)：2012013409
摘要：空氣是人類賴以生存的必須環(huán)境，也是微生物借以擴(kuò)散的媒介?？諝庵写嬖谥?xì)菌、真菌、病毒、放線菌等多種微生物粒子，這些微生物粒子是空氣污染物的重要組成部分。而實(shí)驗(yàn)室中的環(huán)境是更為重要的，對(duì)微生物的要求更加的高，一個(gè)好的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境可以讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加的精確。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)實(shí)驗(yàn)室空氣的采集，對(duì)微生物的培養(yǎng)及染色觀察來證明證明實(shí)驗(yàn)室環(huán)境存在微生物，也證明無菌操作的重要性。
關(guān)鍵詞：實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，空氣，微生物檢測，革蘭氏染色，形態(tài)觀察
正文：
前言
實(shí)驗(yàn)室空氣微生物含量多少可以反映該實(shí)驗(yàn)室的空氣質(zhì)量，需要測定空氣中的微生物數(shù)量和空氣污染微生物。實(shí)驗(yàn)室的空氣中微生物越少，代表在該實(shí)驗(yàn)室做微生物實(shí)驗(yàn)的時(shí)候誤差會(huì)小，成功率會(huì)高。本實(shí)驗(yàn)以牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中的微生物，利用革蘭氏染色法及顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)室中空氣中的微生物種類及形態(tài)。
1. 材料方法
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1樣品來源
實(shí)驗(yàn)室空氣
1.1.2藥品
氫氧化鈉（固體），牛肉膏，蛋白胨，瓊脂粉，nacl。
1.1.3耗材
培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基）無菌水，石棉網(wǎng)，電爐，酒精燈，培養(yǎng)皿，三角瓶，500ml燒杯，玻璃棒，超凈工作臺(tái)，ph試紙。
1.2方法
1.2.1取樣
采集實(shí)驗(yàn)室空氣樣本
1.2.2制作培養(yǎng)基
在500ml燒杯內(nèi)加水200毫升，放入牛肉膏1.0g、蛋白胨2.0g和氯化鈉1.0g，做記號(hào)，放在火上加熱，待燒杯內(nèi)各組分溶解后，加入瓊脂4.0g，不斷攪拌以免粘底。停止加熱后冷卻，加入配置的naoh溶液調(diào)節(jié)ph值至7.2-7.5后倒入三角瓶。
1.2.3高壓滅菌
將培養(yǎng)皿和三角瓶用報(bào)紙及繩包裝后，利用高壓滅菌鍋將培養(yǎng)皿和裝有培養(yǎng)液的三角瓶高壓滅菌，121度維持20分鐘.
1.2.4分裝培養(yǎng)液及加入樣本
在超凈工作臺(tái)上將三角瓶中的培養(yǎng)液分裝到6個(gè)培養(yǎng)皿當(dāng)中，等培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液冷卻凝固，將其中三個(gè)加入實(shí)驗(yàn)室中的空氣樣本，二個(gè)加入超凈工作臺(tái)空氣，一個(gè)作為對(duì)照組。對(duì)照組a，實(shí)驗(yàn)組b貼標(biāo)簽做記號(hào)，倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
1.2.5革蘭氏染色，觀察其種類，形態(tài)
將培養(yǎng)好的帶有微生物菌落的培養(yǎng)基拿出，取干凈的載玻片于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，在載玻片中央滴一滴無菌蒸餾水，將接種環(huán)在火焰上燒紅，待冷卻后從斜面挑取少量菌種與玻片上的水滴混勻后，在載玻片上涂布成一均勻的薄層，涂布面不宜過大。利用高溫，手持載玻片的一端，標(biāo)本向上，在酒精燈火焰外層盡快的來回通過2~3次，共約2~3秒鐘，放置待冷后，進(jìn)行染色。初染：用結(jié)晶紫染色1min后水洗，吸干。媒染：加碘液1min后水洗，吸干。脫色：用脫色液（95%乙醇）脫色30s，水洗，吸干。復(fù)染：用番紅
復(fù)染3min，水洗，吸干。待標(biāo)本片干后置顯微鏡下，用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目標(biāo)物后用油鏡觀察，注意細(xì)菌細(xì)胞的顏色。
2. 結(jié)果與分析
2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖1 圖2
圖3 圖4
圖
5
圖6
2.2 分析
此次實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康幕就瓿桑源嬖谝恍┱`差。本實(shí)驗(yàn)采取1個(gè)培養(yǎng)基無菌作為對(duì)照組，另外5個(gè)作為實(shí)驗(yàn)組，3個(gè)采用實(shí)驗(yàn)室空氣，2個(gè)采用超凈工作臺(tái)空氣（1）5個(gè)實(shí)驗(yàn)組中，有一個(gè)培養(yǎng)皿沒有生長出細(xì)菌，由于倒培養(yǎng)基操作時(shí)培養(yǎng)液傾倒過少，導(dǎo)致無法滿足細(xì)菌生長代謝繁殖的所需能量。（2）如圖四，是培養(yǎng)皿中長出的細(xì)菌，經(jīng)查詢，此細(xì)菌為呼吸道內(nèi)的雜菌，由于操作時(shí)操作者不慎咳嗽將菌注入培養(yǎng)皿中。（3）如圖6 使用革蘭氏染色法，但鏡下觀察有重疊現(xiàn)象，制片時(shí)為徹底打散細(xì)菌。
3. 討論
本實(shí)驗(yàn)除了略微操作失誤以外，其他良好，經(jīng)討論，我們認(rèn)為無菌操作時(shí)十分重要的，本實(shí)驗(yàn)操作簡單，步驟清晰，答題沒有改動(dòng)的地方，但在其中一個(gè)操作過程中，把培養(yǎng)皿直接放在教室中和超凈工作臺(tái)上是不可取的，導(dǎo)致上述分析中的
（2）失誤。我們應(yīng)該更加注重?zé)o菌操作。
3. 參考文獻(xiàn)
．《公共場所空氣的微生物檢測報(bào)告》 孫艷萍
.《圖書館內(nèi)外空氣微生物檢測及資源保護(hù)》 王伯秋
[3]. 《基礎(chǔ)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》 主編：陳永富 哈爾濱工程大學(xué)出版社 2009
篇八 大學(xué)生物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告2250字
大學(xué)生物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告
風(fēng)洞試驗(yàn)綜合
一. 風(fēng)洞試驗(yàn)簡述：
實(shí)驗(yàn)空氣動(dòng)力學(xué)是空氣動(dòng)力學(xué)的一個(gè)分支，是用實(shí)驗(yàn)方法研究飛行器及其它物體在與空氣或其它氣體作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)的氣動(dòng)特性、運(yùn)動(dòng)規(guī)律和各種復(fù)雜物理現(xiàn)象。由于是直接研究物體與真實(shí)氣流間的相互作用，所得數(shù)據(jù)可以用作工程設(shè)計(jì)的依據(jù)，驗(yàn)證理論計(jì)算結(jié)果并能揭示新的流動(dòng)現(xiàn)象，為理論分析提供物理模型。
實(shí)驗(yàn)空氣動(dòng)力學(xué)作為一門分支學(xué)科是20世紀(jì)40年代形成的。它的形成同飛行器高速發(fā)展，要求迅速獲得大量復(fù)雜、精確、可靠的設(shè)計(jì)數(shù)據(jù)有關(guān)。它的主要內(nèi)容除空氣動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)理論外，還包括實(shí)驗(yàn)理論、實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)設(shè)備的知識(shí)。
實(shí)驗(yàn)空氣動(dòng)力學(xué)的主要任務(wù)是利用風(fēng)洞進(jìn)行模型實(shí)驗(yàn)，以發(fā)現(xiàn)和確認(rèn)流動(dòng)現(xiàn)象、探索和揭示流動(dòng)機(jī)理、尋求和了解流動(dòng)規(guī)律，并為飛行器提供優(yōu)良?xì)鈩?dòng)布局和空氣動(dòng)力特性數(shù)據(jù)，風(fēng)洞實(shí)驗(yàn)所依據(jù)的基本理論是相對(duì)運(yùn)動(dòng)原理和相似理論。
相對(duì)運(yùn)動(dòng)原理：無論是固體以某一均勻速度在靜止的流體中運(yùn)動(dòng)，還是流體以相同速度流經(jīng)固體，兩者之間的相互作用力恒等。
相似理論：論述物理現(xiàn)象相似的條件和相似現(xiàn)象的性質(zhì)的學(xué)說。是模擬的理論基礎(chǔ)。相似理論的重要課題是確定各種物理現(xiàn)象的相似準(zhǔn)數(shù)。
風(fēng)洞是進(jìn)行空氣動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)的一種主要設(shè)備，幾乎絕大多數(shù)的空氣動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)都在各種類型的風(fēng)洞中進(jìn)行。風(fēng)洞的工作原理是使用動(dòng)力裝置在一個(gè)專門設(shè)計(jì)的管道內(nèi)驅(qū)動(dòng)一股可控氣流，使其流過安置在實(shí)驗(yàn)段的靜止模型，模擬實(shí)物在靜止空氣中的運(yùn)動(dòng)。測量作用在模型上的空氣動(dòng)力，觀測模型表面及周圍的流動(dòng)現(xiàn)象。根據(jù)相似理論將實(shí)驗(yàn)結(jié)果整理成可用于實(shí)物的相似準(zhǔn)數(shù)。實(shí)驗(yàn)段是風(fēng)洞的中心部件，實(shí)驗(yàn)段流場應(yīng)模擬真實(shí)流場，其氣流品質(zhì)如均勻度、穩(wěn)定度（指參數(shù)隨時(shí)間變化的情況）、湍流度等，應(yīng)達(dá)到一定指標(biāo)。
風(fēng)洞實(shí)驗(yàn)的主要優(yōu)點(diǎn)是：
① 實(shí)驗(yàn)條件（包括氣流狀態(tài)和模型狀態(tài)兩方面）易于控制。
② 流動(dòng)參數(shù)可各自獨(dú)立變化。
③ 模型靜止，測量方便而且容易準(zhǔn)確。
④ 一般不受大氣環(huán)境變化的影響 。
⑤ 與其他空氣動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)手段相比，價(jià)廉、可靠等。
缺點(diǎn)是難以滿足全部相似準(zhǔn)數(shù)相等，存在洞壁和模型支架干擾等，但可通過數(shù)據(jù)修正方法部分或大部分克服。
風(fēng)洞實(shí)驗(yàn)的主要常規(guī)試驗(yàn)有測力試驗(yàn)、測壓試驗(yàn)和流態(tài)觀測試驗(yàn)等。測力和測壓試驗(yàn)是測定作用于模型或模型部件（如飛行器模型中的一個(gè)機(jī)翼等）的氣動(dòng)力及表面壓強(qiáng)分布，多用于為飛行器設(shè)計(jì)提供氣動(dòng)特性數(shù)據(jù)。流態(tài)觀測試驗(yàn)廣泛用于研究流動(dòng)的基本現(xiàn)象和機(jī)理。
二. 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
1. 根據(jù)風(fēng)洞實(shí)驗(yàn)段尺寸和實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目要求完成實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕Y(jié)構(gòu)和模型支撐結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)。
2. 編寫模型測力和流動(dòng)顯示實(shí)驗(yàn)大綱（或?qū)嶒?yàn)任務(wù)書）。
3. 固定風(fēng)速，改變模型姿態(tài)（例如，改變模型迎角）測量不同姿態(tài)下的模型氣動(dòng)力；對(duì)模型做重復(fù)性試驗(yàn)。
4. 對(duì)測力模型做流動(dòng)顯示實(shí)驗(yàn)（分別做模型煙流顯示實(shí)驗(yàn)和油流顯示實(shí)驗(yàn)）
三. 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備：
d1低速風(fēng)洞主要組成部分為實(shí)驗(yàn)段、擴(kuò)壓段、拐角和導(dǎo)流片、穩(wěn)定段、收縮段以及動(dòng)力段。實(shí)驗(yàn)段截面為橢圓面，其入口長軸為102cm，短軸為76cm，出口處長軸為107cm，短軸為81cm；實(shí)驗(yàn)段全長1.45m；實(shí)驗(yàn)段的最大流速為50m/s；紊流度為0.3%；實(shí)驗(yàn)段模型安裝區(qū)內(nèi)，速壓不均勻度3%。其上游收縮段的收縮比為8.4。d1低速風(fēng)洞采用可控硅控制無級(jí)調(diào)速；配置有尾撐式—機(jī)構(gòu)及內(nèi)式六分量應(yīng)變天平。由信號(hào)放大器（gda—10），a/d模數(shù)轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)采集板和計(jì)算機(jī)構(gòu)成測力天平信號(hào)數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)。
實(shí)驗(yàn)原理：
當(dāng)物體以某一速度在靜止的空氣中運(yùn)動(dòng)時(shí)，氣流對(duì)物體的作用與同一速度的氣流流過靜止物體時(shí)的作用完全相同。風(fēng)洞就是一種產(chǎn)生人工氣流，對(duì)固定于風(fēng)洞試驗(yàn)段的模型產(chǎn)生氣動(dòng)力作用的管道設(shè)備。
六分量應(yīng)變天平：是一種專用的測力傳感器。用于測量作用在模型上的空氣動(dòng)力的大小。該天平能測量升力、阻力、側(cè)力、俯仰力矩、偏航力矩和滾轉(zhuǎn)力矩。它由應(yīng)變片、彈性元件、天平體和一些附件組成。應(yīng)變天平是一種將機(jī)械量轉(zhuǎn)變?yōu)殡娏枯敵龅膶Ｓ迷O(shè)備。它是運(yùn)用位移測量原理，利用天平的變形來測量外力大小。將應(yīng)變片貼在天平彈性元件上，彈性元件上的應(yīng)變與外力大小成比例，應(yīng)變片連接組成測量電橋，接入測量線路中，即可測出力的大小。應(yīng)變天平在測量過程中的`參量變化過程如下：
pruv
其中：
p—天平彈性元件上承受的氣動(dòng)力。
—在氣動(dòng)力p的作用下彈性元件上的應(yīng)變。
r—貼在彈性元件上的應(yīng)變片在彈性元件產(chǎn)生應(yīng)變的情況下產(chǎn)生的電阻增量。
u—由應(yīng)變片產(chǎn)生的電阻增量r而引起的測量電橋產(chǎn)生的輸出電壓增量（mv）。
v—檢測儀器所指示的讀數(shù)增量（v）。
右下圖為一六分量應(yīng)變天平測量電橋示意圖。圖中標(biāo)有號(hào)碼處為粘貼有電阻應(yīng)變片的天平元件。例如號(hào)碼1、2、3、4為天平升力元件的四個(gè)電阻阻值相等的應(yīng)變片，它們構(gòu)成了一個(gè)全橋電路。當(dāng)天平升力元件
受載后，在電橋ac端將會(huì)有電壓信號(hào)u輸出，
該信號(hào)u將被引入信號(hào)放大器。
信號(hào)放大器（gda—10）：其功用是將來自于天平
各分量電橋的微小電壓輸出放大到能被計(jì)算機(jī)接
受的電壓值。
a/d模數(shù)轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)采集板：由于計(jì)算機(jī)只能處理數(shù)
字信號(hào)，而天平各分量的輸出信號(hào)是模擬信號(hào)，因
此須先用a/d模數(shù)轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)采集板將天平輸出的模擬信號(hào)轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)，方能由計(jì)算機(jī)對(duì)采集的信號(hào)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。
計(jì)算機(jī)：通過已有程序軟件對(duì)試驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臏y力進(jìn)行過程控制、數(shù)據(jù)采集和后處理。 模型煙線流動(dòng)顯示、表面油流顯示原理參見附錄1、2。
四. 實(shí)驗(yàn)步驟：
1） 將實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ桶惭b于測力天平上。對(duì)試驗(yàn)?zāi)Ｐ妥鏊交虼怪闭{(diào)整。將模型的
攻角、側(cè)滑角分別調(diào)整為0角。
2） 檢查各有關(guān)設(shè)備之間的連線是否連接正確。
3） 打開計(jì)算機(jī)，然后是放大器及天平電源。
4） 通過計(jì)算機(jī)測力系統(tǒng)軟件檢測天平各分量的信號(hào)輸出值是否正常。通常未
篇九 生物實(shí)驗(yàn)室述職報(bào)告模板1200字
時(shí)間過地飛快，忙忙碌碌中又過了一學(xué)年，在這一學(xué)年里，我一向以一名優(yōu)秀實(shí)驗(yàn)員的標(biāo)準(zhǔn)要求自己，認(rèn)真學(xué)習(xí)，努力工作，用心思考，力求在工作、學(xué)習(xí)上有進(jìn)步，在教師修養(yǎng)上有提高，爭取做一名合格的實(shí)驗(yàn)員。
在思想上，熱愛祖國，熱愛____，堅(jiān)決擁護(hù)黨的領(lǐng)導(dǎo)及路線、方針、政策;提高認(rèn)識(shí)，增強(qiáng)緊迫感、時(shí)代感、職責(zé)感，適應(yīng)發(fā)展要求，強(qiáng)化“六個(gè)意識(shí)”：第一，強(qiáng)化自我充電意識(shí);第二，強(qiáng)化科研意識(shí);第三，強(qiáng)化信息網(wǎng)絡(luò)意識(shí);第四，強(qiáng)化合作意識(shí);第五，強(qiáng)化創(chuàng)新意識(shí);第六，強(qiáng)化服務(wù)意識(shí)。
在工作上，踏實(shí)進(jìn)取、認(rèn)真謹(jǐn)慎，盡職盡責(zé)，對(duì)自己負(fù)責(zé)、對(duì)單位負(fù)責(zé)、樹立大局意識(shí)、服務(wù)意識(shí)、使命意識(shí)，努力把“全心全意為學(xué)校服務(wù)”的宗旨體此刻每個(gè)細(xì)節(jié)中;以改善工作作風(fēng)、講求工作方法、注重工作效率、提高工作質(zhì)量為目標(biāo)，用心努力，較好地完成了全年的各項(xiàng)工作任務(wù)。
本學(xué)期生物實(shí)驗(yàn)室的工作重點(diǎn)仍是為輔助生物理論教學(xué)的順利進(jìn)行，開展好實(shí)驗(yàn)教學(xué)。生物實(shí)驗(yàn)具備培養(yǎng)學(xué)生觀察和動(dòng)手潛力的功能，更有培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)腦、啟迪思維、開發(fā)潛能的作用，現(xiàn)將本學(xué)期生物實(shí)驗(yàn)工作做如下總結(jié)：
一、隨著學(xué)期工作的結(jié)束，實(shí)驗(yàn)室的維護(hù)與管理工作又將開始，為新學(xué)期理論教學(xué)工作的順利開展做好準(zhǔn)備，實(shí)驗(yàn)室的管理工作是一個(gè)不可缺的重要環(huán)節(jié)，個(gè)性是二線為教學(xué)服務(wù)的管理工作，是較零碎而不大起眼的工作。但是，在管理工作上，仍要將儀器進(jìn)行科學(xué)規(guī)范管理。實(shí)驗(yàn)室的儀器較多，繁雜。規(guī)范的管理可使人看上去就要有一種既科學(xué)又舒適的感覺。因此在原有的管理上，除了將儀器進(jìn)行分門別類分柜，分層放置，儀器貼有標(biāo)簽等外，按照管理和實(shí)驗(yàn)的性能，將儀器進(jìn)一步規(guī)范化，這樣一來教師使用方便，效率較高。
二、本學(xué)期期末仍要做好儀器防銹，防塵，防潮等工作，儀器使用以后防銹工作不可少的，個(gè)性是較精密的顯微鏡等儀器，每使用后，要認(rèn)真清理和擦試鏡頭和有關(guān)活動(dòng)的部件，然后裝入箱內(nèi)保存，定期進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)問題立即采取措施。讓所保管的所有儀器幾乎無銹、無塵和受潮現(xiàn)象。
三、認(rèn)真做好儀器的維修工作。每一學(xué)期結(jié)束前，必須要將儀器進(jìn)行全面清理和維修，為下學(xué)期做好充分準(zhǔn)備工作。
四、輔助一線教師提高生物教學(xué)效果，優(yōu)質(zhì)服務(wù)是二線工作人員的職責(zé)，也是學(xué)校發(fā)展的基礎(chǔ)。因此在實(shí)驗(yàn)管理工作中，除了要熟悉教材，還要掌握分組實(shí)驗(yàn)和演示實(shí)驗(yàn)與教師任課的大致進(jìn)度和時(shí)間，做好實(shí)驗(yàn)的一切準(zhǔn)備工作。
五、生物實(shí)驗(yàn)室的工作屬二線管理工作，在工作中幾乎不會(huì)有較大的教學(xué)成果，工作壓力也不會(huì)有一線教師的那么大。但是，隨著社會(huì)的發(fā)展，學(xué)校的工作也會(huì)隨著發(fā)展和變化。因此在本學(xué)期完成任務(wù)的前提下，應(yīng)充分利用余業(yè)時(shí)間學(xué)習(xí)專業(yè)知識(shí)和一些管理常識(shí)，不斷豐富自己，爭取早日像一線教師一樣站在最前線努力工作或使自己的管理工作更具特色，為以后的學(xué)校的發(fā)展做出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。
六、按時(shí)打掃實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生，確保室內(nèi)外的整潔。實(shí)驗(yàn)室的整潔能夠讓任課教師和學(xué)生的情緒舒坦，是任課教師上課更有效率，學(xué)生學(xué)習(xí)更有激情。
篇十 食品微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告3200字
食品微生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告
食品微生物實(shí)驗(yàn)
霉菌的培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察：實(shí)驗(yàn)一真菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
（1）了解培養(yǎng)基的配置原理和方法，掌握分離培養(yǎng)微生物的有關(guān)準(zhǔn)備工作。
（2）掌握高壓滅菌方法及原理
實(shí)驗(yàn)原理：
（1）培養(yǎng)基的制備原理：
培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。
從營養(yǎng)角度分析：
營養(yǎng)：碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機(jī)鹽等；？適宜的酸堿度(ph值)和一定緩沖能力；？一定的氧化還原電位；？合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì)，是應(yīng)用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反復(fù)融化，其凝固性降低。
（2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌
在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫
度也隨之增加。在0.1mpa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
配制培養(yǎng)基所需器材
實(shí)驗(yàn)設(shè)備：高壓蒸汽滅菌器。
實(shí)驗(yàn)器材：500ml三角燒瓶、藍(lán)蓋瓶、5ml刻度吸管、培養(yǎng)基、天平、砝碼、
稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。
培養(yǎng)基等集中放講臺(tái)前高壓桶內(nèi)，送到洗刷室統(tǒng)一高壓滅菌條件及注意事項(xiàng)
高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養(yǎng)基113℃，15min。
倒平板電爐加熱滅菌好的培養(yǎng)基打開平皿包裝倒平板（10塊）注意事項(xiàng)：空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）。
a.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。
b.瓶口要過火焰。
c.左手掀開平皿小口。
d.傾注滿皿底再多一點(diǎn)，約10ml（7cm直徑平皿）。
e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養(yǎng)過程中污染雜菌。
f.完全凝固再翻轉(zhuǎn)平板放塑料筐內(nèi)，4℃?zhèn)溆谩?/p>
分析與討論
（1）如何證明培養(yǎng)基滅菌是否徹底？
把滅菌后的培養(yǎng)基按滅菌鍋內(nèi)的不同位置，每處抽取數(shù)管(瓶)，標(biāo)上記號(hào)，置25℃～30℃培養(yǎng)一周左右進(jìn)行檢查。如果培養(yǎng)基沒有什么變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養(yǎng)基出現(xiàn)了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導(dǎo)致蒸汽不暢，或鍋的結(jié)構(gòu)不合理等原因所致，應(yīng)根據(jù)上述情況進(jìn)行改進(jìn)；如果大部分或全部菌種瓶都出現(xiàn)雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時(shí)間不夠，應(yīng)提高壓力或延長滅菌時(shí)間。經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
經(jīng)過幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
（2）為什么說消毒與滅菌是微生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)必不可少的基本知識(shí)？由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過不同途徑和媒介進(jìn)入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對(duì)于切斷傳播途徑、預(yù)防和控制其感染具有重要意義。自古以來，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達(dá)到預(yù)防疾病的目的.。實(shí)際上，除了在臨床醫(yī)療實(shí)踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過程中都需要避免微生物的污染。
實(shí)驗(yàn)二霉菌的接種與培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求：掌握霉菌與酵母菌的接種與培養(yǎng)方法。
實(shí)驗(yàn)原理：
接種是微生物實(shí)驗(yàn)及科學(xué)研究中一項(xiàng)基本操作技術(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?/p>
選擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無菌操作。
無菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進(jìn)行，所有器皿均須嚴(yán)格消毒，培養(yǎng)基應(yīng)事先做無菌試驗(yàn)，
接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養(yǎng)四大類微生物時(shí)應(yīng)注意選擇適宜的培養(yǎng)條件。多數(shù)細(xì)菌為專性需氧菌與兼性需氧菌，少數(shù)為厭氧菌。多數(shù)食品腐敗菌和工業(yè)用菌種，以及人和動(dòng)物病原菌的最適生長溫度為37℃，并且在近中性（ph6.5～7.5）條件下生長良好。多數(shù)放線菌為好氧菌，少數(shù)為厭氧菌，最適生長溫度為28～30℃，多數(shù)適宜在偏堿性環(huán)境中生長（ph7.5～8.5）。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
（1）實(shí)驗(yàn)材料：實(shí)驗(yàn)設(shè)備：溫箱。
實(shí)驗(yàn)器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細(xì)黃鏈霉菌、pda平板、高鹽察氏平板、高氏合成i號(hào)平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。
（2）實(shí)驗(yàn)方法：平板接種：毛霉→pda平板（點(diǎn)植法）
啤酒酵母→pda平板（五區(qū)分離劃線法）青霉、曲霉→pda平板（連續(xù)劃線法）
小室載玻片培養(yǎng)法：
1、取滅菌后小室平皿。
2、取無菌pda瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～1.0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養(yǎng)小室中的載玻片上，制作過程注意無菌。
3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養(yǎng)基四周，用無菌鑷子
將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并(轉(zhuǎn)載于:l滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標(biāo)記，置28～30℃培養(yǎng)3～5d
糧食產(chǎn)品的平板接種：
1.取糧食樣品20g，放入無菌燒杯，加無菌水洗滌，
反復(fù)10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內(nèi)備用2.鑷子取糧食種入pda瓊脂內(nèi)，每皿可接種5-10粒。
放線菌的接種：取細(xì)黃鏈霉菌劃線法接種，在接種的劃線處，無
菌操作斜插入蓋玻片數(shù)張。
注意事項(xiàng)：
1.空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）
2.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。
3.接種環(huán)使用前，直接在酒精燈上燒灼滅菌，把環(huán)和金屬絲燒紅即可。
4.接種環(huán)使用后，先在火焰周圍把環(huán)上標(biāo)本烤干，再燒灼滅菌，以免標(biāo)本汽化，爆烈四濺，污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過火焰2－3次，殺滅表面微生物
分析與討論
1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類及產(chǎn)生毒素？
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細(xì)黃鏈霉菌（放線菌）青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細(xì)黃鏈菌素
2、常用霉菌培養(yǎng)基有哪些？
馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基
豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基
3、霉菌的接種方法有何不同？為什么？
（1）連續(xù)劃線法（青霉、曲霉）
青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應(yīng)采用連續(xù)劃線接種法接種。（2）點(diǎn)植法（根霉、毛霉）
根霉與毛霉生長區(qū)域比較大，應(yīng)采用點(diǎn)植法。（3）小室載玻片培養(yǎng)法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）
實(shí)驗(yàn)三霉菌的制片與形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法；
了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線菌的基本形態(tài)特征。
實(shí)驗(yàn)原理：霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多（約為3-10μm），常是細(xì)
菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大，細(xì)胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以制標(biāo)本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液，用此染液做霉菌制片的特點(diǎn)是細(xì)胞不變形，具有殺菌、__作用，不易干燥，能保持較長時(shí)間，能防止孢子四處飛散，棉蘭具有一定的染色作用，染液的藍(lán)色能增大反差。
實(shí)驗(yàn)材料：
（一）菌種：在馬鈴薯瓊脂平板上培養(yǎng)3—4天的青霉(penicilliumsp.)、曲霉(aspergillussp.)、毛霉（mucorsp.）、根霉；
（二）器材及用具：鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)方法：
（一）直接制片觀察
于潔凈載玻片上，用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲，然后小心地蓋上蓋玻
片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時(shí)再換高倍鏡（二）小室培養(yǎng)觀察
將載玻片直接放低倍鏡下觀察，再換高倍鏡觀察。
觀察原則：
毛霉：用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形
狀、大小。
根霉：菌絲、孢子同毛霉，注意觀察有無假根。
曲霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子著生位置，辨認(rèn)分生孢
子梗、頂囊、小梗和分生孢子。
青霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形狀等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
分析與討論：
青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同？
青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上，菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)的每一個(gè)分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青綠色，進(jìn)行孢子生殖。
曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中，曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀，球狀結(jié)構(gòu)的表面放射狀地生有成串的孢子，孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。
從皮膚取材查真菌如何檢查？
食品微生物實(shí)驗(yàn)
篇十一 初一學(xué)生物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告900字
“浮力消失”了
做下面的小試驗(yàn)。
器材
找一個(gè)底面很平的容器，讓一個(gè)蠟燭頭緊貼在容器底部，再往容器里倒水，蠟燭頭并不會(huì)浮起來；輕輕地把蠟燭頭撥倒，它立刻就會(huì)浮起來。
可見，當(dāng)物體與容器底部緊密接觸時(shí)，兩個(gè)接觸面間就沒有液體滲入，物體的下表面不再受液體對(duì)它向上的壓強(qiáng)，液體對(duì)它就失去了向上托的力，浮力當(dāng)然隨之消失了。
現(xiàn)在，你能提出為潛艇擺脫困境的措施了嗎？
“浮力是怎樣產(chǎn)生的”，學(xué)生對(duì)“浮力就是液體對(duì)物體向上的壓力和向下的壓力之差”這一結(jié)論是可以理解的，但卻難以相信，因此做好浮力消失的實(shí)驗(yàn)是攻克這一難點(diǎn)的關(guān)鍵，下面介紹兩種簡便方法。
[方法1]
器材：大小適當(dāng)?shù)牟Ａ┒?化學(xué)實(shí)驗(yàn)室有)一個(gè)、乒乓球一只、紅水一杯。
步驟：
(1)將乒乓球有意撳入水中，松手后乒乓球很快浮起。
(2)用手托住漏斗(喇叭口朝上，漏斗柄夾在中指和無名指之間)，將乒乓球放入其中，以大拇指按住乒乓球，將水倒入漏斗中，松開拇指，可見乒乓球不浮起，(這時(shí)漏斗柄下口有水向下流，這是因?yàn)槠古仪蚺c漏斗間不太密合)。
(3)用手指堵住出水口，可見漏斗柄中水面逐漸上升，當(dāng)水面升至乒乓球時(shí)，乒乓球迅即上浮。(若漏斗柄下口出水過快，可在乒乓球與漏斗接觸處墊一圈棉花，這樣可以從容地觀察水在漏斗柄中上升的情況。)
[方法2]
器材：透明平底塑料桶(深度10cm左右，口徑宜大些，便于操作)一只、底面基本平整的木塊(如象棋子、積木、保溫瓶塞等)一個(gè)、筷子一根、水一杯。
制作小孔桶：取一鐵扦在酒精燈上燒紅，在塑料桶底面中央穿一小孔、孔徑1cm左右，用砂紙將孔邊磨平即成一小孔桶。
步驟：
(1)將木塊有意撳入水中，松手后木塊很快浮起。
(2)將木塊平整的一面朝下放入小孔桶中并遮住小孔，用筷子按住木塊，向桶中倒水。移去筷子，可見木塊不浮起。(這時(shí)小孔處有水向下滴，這是因?yàn)槟緣K與桶的接觸面之間不很密合)。
(3)用手指堵住小孔，木塊立即上浮。
上述兩例針對(duì)實(shí)際中物體的表面不可能絕對(duì)平滑這一事實(shí)，巧妙地利用“小孔滲漏”使水不在物體下面存留，從而使物體失去液體的向上的壓力，也就失去了浮力，結(jié)果本應(yīng)浮在水面上的乒乓球和木塊卻被牢牢地釘在了水底，不能不令學(xué)生嘆服。接著步驟(3)又魔術(shù)般地使浮力再現(xiàn)，更令學(xué)生情緒高漲，躍躍欲試。
學(xué)生自己觀察問題、解決問題。
篇十二 觀察洋蔥表皮細(xì)胞的生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告2150字
觀察洋蔥表皮細(xì)胞的生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一觀察洋蔥表皮細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^觀察洋蔥表皮細(xì)胞，說明植物體是由細(xì)胞組成的實(shí)驗(yàn)材料：：顯微鏡、洋蔥、鑷子、滴管、水、載玻片、針、蓋玻片、吸水紙、紗布。實(shí)驗(yàn)步驟：
（一)制做臨時(shí)裝片。
（1）用紗布將載玻片、蓋玻片擦干凈。
（2）用液管在載玻片上滴一滴清水。
（3）用鑷子在洋蔥鱗片葉上撕下一小片表皮。
（4）將撕下的表皮放入載玻片上的水滴中，用針將其展開。
（5）用鑷子夾住蓋玻片，先將一邊接觸載玻片的水滴邊經(jīng)再慢慢把蓋玻片放平，制成臨時(shí)切片。
（4）在蓋玻片的翼側(cè)滴加稀碘液，用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引，使染液浸潤標(biāo)本的全部。
（二）安裝臨時(shí)裝片：將臨時(shí)切片放到顯微鏡上，調(diào)整顯微鏡與臨時(shí)切片位置，直到可以觀察到清晰的圖像為止實(shí)驗(yàn)圖像：
200倍800倍
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：洋蔥表皮是由無數(shù)細(xì)胞構(gòu)成的，有明顯的細(xì)胞核，細(xì)胞壁，細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)。
二．觀察人的口腔上皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)教案
1、學(xué)習(xí)要求：
1.制作和觀察人的口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片。2.認(rèn)識(shí)人的口腔上皮細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。
2、材料用具：
生理鹽水，稀碘液，消毒牙簽，滴管，紗布，鑷子，吸水紙，載玻片，蓋玻片，顯微鏡。
3、實(shí)驗(yàn)方法和步驟：
1.用潔凈的紗布將載玻片和蓋玻片擦拭干。2.在載玻片中央滴一滴生理鹽水。
3.用消毒牙簽在口腔內(nèi)側(cè)壁輕刮幾下放在生理鹽水中。
4.用鑷子夾起蓋玻片，使它的一邊先接觸載玻片上的水滴，再將蓋玻片緩緩放平蓋在水滴。
5.在蓋玻片的一側(cè)滴加幾滴稀碘液，用吸水紙?jiān)谏w玻片的另一側(cè)吸引，使碘液浸潤標(biāo)本的全部。
總結(jié)步驟：
擦-→滴-→取-→蓋-→染-→吸五、繪制人的口腔上皮細(xì)胞
三．測定某種食物中的能量
實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)一顆花生種子含有多少能量？
實(shí)驗(yàn)器材或藥品 水
實(shí)驗(yàn)探究過程 現(xiàn)象
分析及結(jié)論
1、在錐形瓶中裝30ml水
實(shí)驗(yàn)前水溫：
2、把花生固定在解剖20℃、20℃、24℃
針上
試驗(yàn)后水溫：
3、在酒精燈上點(diǎn)燃花73℃、78℃、68℃
4.2j生并盡快把花生放到錐
溫差：×51×4.2=6300j
形瓶下面 53℃、58℃、44℃ 、待花生完全燒完后，平均值：51.666℃
一顆花生種子約含有6300j
實(shí)驗(yàn)結(jié)的能量論
四．探究饅頭在口腔中的變化實(shí)驗(yàn)報(bào)告
一、問題的提出：取一塊饅頭放到口中咀嚼?？谇恢械酿z頭要經(jīng)過牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及與唾液的混合。細(xì)細(xì)品嘗這時(shí)的饅頭，你能嘗出一些甜味來。饅頭變甜是否與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌有關(guān)呢？如果有關(guān)，它們各起什么作用呢？饅頭變甜是否是淀粉發(fā)生了變化？
二、作出假設(shè)饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)。饅頭變甜是因?yàn)榈矸郾煌僖褐械耐僖旱矸勖阜纸獬闪藥в刑鹞兜腵麥芽糖。在這個(gè)過程中，通過牙齒的咀嚼將饅頭嚼碎，舌的攪拌使饅頭碎屑與唾液充分混合。
三、制定計(jì)劃（一）實(shí)驗(yàn)原理
饅頭變甜應(yīng)該是成分中糖類發(fā)生變化。饅頭的主要成分是淀粉，因此本實(shí)驗(yàn)利用淀粉遇碘變藍(lán)的特性，以及口腔中的溫度為37℃的常識(shí)?？刂谱兞客僖海约澳M牙齒的咀嚼作用和舌的攪拌作用。三支試管，兩個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)。一支試管作為實(shí)驗(yàn)組，另兩支試管作為對(duì)照組。如果模擬牙齒的咀嚼功能、舌的攪拌功能并加入唾液，滴入碘液后，實(shí)驗(yàn)組的試管內(nèi)沒有變成藍(lán)色，說明饅頭中淀粉的變化與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)。如果變成藍(lán)色，則說明淀粉沒有被分解，饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌沒有關(guān)系。（二）實(shí)驗(yàn)變量的控制
兩個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)。一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)變量是唾液，實(shí)驗(yàn)組內(nèi)加入唾液2ml，對(duì)照組試管加入2ml清水。另一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)變量是饅頭塊的狀態(tài)：實(shí)驗(yàn)組的饅頭塊用刀切碎，放入試管中并震蕩試管，對(duì)照組的饅頭塊不做任何處理，直接整塊放入試管中，并且不震蕩試管。
（三）實(shí)驗(yàn)方案實(shí)驗(yàn)材料用具：饅頭塊（三小塊等大）試管（三支）燒杯（三個(gè)）盛唾液的小燒杯滴管溫度計(jì)石棉網(wǎng)三腳架碘液小刀小木板
1.取新鮮的饅頭，切成大小相同的a、b、c三小塊。將a塊和b塊分別用刀細(xì)細(xì)地切碎，拌勻（模擬牙齒的咀嚼和舌的攪拌），c塊不做任何處理。
2.用涼開水將口漱凈，口內(nèi)含一塊消毒棉絮。約1分鐘之后，用
干凈的鑷子取出棉絮，將棉絮中的唾液擠壓到小燒杯中。
3.取3支潔凈的試管，分別編上（1）、（2）、（3）號(hào)，然后做如下處理：
將a饅頭碎屑放入（1）號(hào)試管中，注入2ml唾液并震蕩試管；將b饅頭碎屑放入（2）號(hào)試管，注入2ml清水并震蕩試管；將c饅頭放入（3）號(hào)試管，不震蕩。將三支試管一起放入37℃左右的溫水中。4.5-10分鐘后，取出這三支試管，各滴加2滴碘液，搖勻。然后，觀察并記錄各試管中的顏色變化。四：實(shí)施計(jì)劃
按確定的探究計(jì)劃進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象?？梢?，（1）號(hào)試管中沒有變成藍(lán)色；（2）號(hào)試管變成藍(lán)色；（3）號(hào)試管中的饅頭塊部分變成藍(lán)色。
五、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論
分析實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，（1）號(hào)試管中滴入碘液后，沒有變成藍(lán)色，說明試管中已經(jīng)沒有淀粉，淀粉被唾液中的唾液淀粉酶分解成麥芽糖了，麥芽糖沒有遇碘變藍(lán)的特性，所以滴入碘液后不變藍(lán)。（2）號(hào)試管中加入的是清水和饅頭碎屑，水沒有消化淀粉的作用，因此，滴入碘液后，饅頭碎屑中淀粉遇碘變成藍(lán)色。（3）號(hào)試管中只有部分變成藍(lán)色，說明饅頭與唾液的接觸不充分，只有部分淀粉被分解。由此，得出結(jié)論：說明饅頭變甜與牙齒的咀嚼、舌的攪拌以及唾液的分泌都有關(guān)系。因?yàn)樯鲜龌顒?dòng)模擬了消化與唾液的分泌以及牙齒的咀嚼、舌的攪拌，（1）號(hào)試管中的饅頭接觸到了足量的唾液，并被消化。
篇十三 生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式850字
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
1.還原糖的鑒定原理 生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛基或游離酮基)，因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實(shí)驗(yàn)中，用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1 g/ml的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05 g/ml的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍(lán)色的'cu(oh)2沉淀。cu(oh)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的cu2o沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下：
ch2oh—(choh)4—cho+2cu(oh)2→ch2oh—(choh)4—cooh+cu2o↓+2h2o
用斐林試劑鑒定還原糖時(shí)，溶液的顏色變化過程為：淺藍(lán)色 棕色 磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質(zhì)的鑒定原理 鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí)，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1 g/ml的氫氧化鈉溶液(a)和質(zhì)量濃度為0.01 g/ml(b)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(naoh)中，雙縮脲(h2noc—nh—conh2)能與cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物，這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。
3.脂肪的鑒定原理 脂肪可以被蘇丹ⅲ染成橘黃色，被蘇丹ⅳ 染成紅色
三、實(shí)驗(yàn)過程(見書p18)
四、實(shí)驗(yàn)用品(見書p18)
五、注意
1.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn)，在加熱試管中的溶液時(shí)，應(yīng)該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者，以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管，造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲a，再加雙縮脲b
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么？
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式
篇十四 大學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)格式250字
大學(xué)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)格式
實(shí)驗(yàn)一 血清蛋白質(zhì)醋酸纖維薄膜電泳
[目的][原理]
[儀器組成]
[操作與結(jié)果]
[結(jié)果粘貼]
實(shí)驗(yàn)二 酶的特異性
[目的][原理]
[操作與結(jié)果]
將以上1、2、3號(hào)試管置于37℃水浴箱保溫10分鐘。然后向各管中加班氏試劑20滴，沸水中煮沸10分鐘，取出勿振搖試管，觀察結(jié)果并記錄。
[分析]三管結(jié)果及原因。
實(shí)驗(yàn)三溫度、ph、激活劑、抑制劑
對(duì)酶反應(yīng)的影響
[目的'][原理]
[操作與結(jié)果]
（一）溫度對(duì)酶反應(yīng)的影響
[分析各管的顏色變化原因]
（二）ph對(duì)酶反應(yīng)的影響
[分析各管的顏色變化原因]
篇十五 生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告2350字
關(guān)于生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告
四川大學(xué)-生物技術(shù)-綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告-學(xué)生版
生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)
甘薯γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-gcs)基因的克隆和原核表達(dá)
學(xué)生： 學(xué)號(hào)：
同實(shí)驗(yàn)者：
<研究背景>;
谷胱甘肽(glutathione， gsh) gsh具有多種重要生理功能， 抗自由基和抗氧化應(yīng)激作用， 保護(hù)細(xì)胞膜的完整性等。γ-gcs是植物細(xì)胞中g(shù)sh生物合成的限速酶， 可以調(diào)控gsh的生物合成量。gsh在生物體抵御冷害、干旱、重金屬、真菌等脅迫過程中起著重要作用， 說明γ-gcs也與植物抗逆過程密切相關(guān)。
實(shí)驗(yàn)一 甘薯葉片rna提取
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1. 了解真核生物rna提取的原理；
2. 掌握trizol提取的方法和步驟。
二、實(shí)驗(yàn)原理
trizol 試劑是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的單相的快速抽提總rna的試劑，在勻漿和裂解過程中，能在破碎細(xì)胞、降解細(xì)胞其它成分的同時(shí)保持rna的完整性。trizol的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細(xì)胞，使細(xì)胞中的蛋白，核酸物質(zhì)解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質(zhì)，但不能完全抑制rna酶活性，因此trizol中還加入了8－羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內(nèi)源和外源rnase（rna酶）。0.1%的8－羥基喹啉可以抑制rnase，與氯仿聯(lián)合使用可增強(qiáng)抑制作用。異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑，可溶解蛋白質(zhì)并使蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)消失，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)降解，核蛋白迅速與核酸分離。β-巰基乙醇的主要作用是破壞rnase蛋白質(zhì)中的二硫鍵。在氯仿抽提、離心分離后，rna處于水相中，將水相轉(zhuǎn)管后用異丙醇沉淀rna。用這種方法得到的總 rna中蛋白質(zhì)和dna污染很少。
三、實(shí)驗(yàn)材料
1. 材料
甘薯（ipomoea batatas lam）葉片，品種為徐薯18
2. 試劑
① 無rna酶滅菌水：加入0.01%的depc，處理過夜后高壓滅菌；
② trizol試劑；
③ 氯仿；
④ 異丙醇、75％乙醇；
⑤ tbe緩沖液；
⑥ 上樣緩沖液（6×）
3. 儀器
高壓滅菌鍋、微量移液器、臺(tái)式離心機(jī)、超凈工作臺(tái)、電泳儀、電泳槽、凝膠成像系統(tǒng)、1.5ml塑料離心管、槍頭和ep管架
四、實(shí)驗(yàn)方法
1. 將葉片取出放入研缽中，加入適量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100 mg植物葉片加入1 ml trizol試劑，室溫放置5 min，使樣品充分裂解；
2. 每1 ml trizol試劑加入200 μl氯仿，用手劇烈振蕩混勻后室溫放置3-5 min使其自然分相；
3. 4℃ 12，000 rpm 離心15 min，吸取上層水相轉(zhuǎn)移到新管中；在上清中加入等體積冰冷的異丙醇，室溫放置15 min；
4. 4℃ 12，000 rpm 離心10 min，棄上清，rna沉淀于管底；
5. rna沉淀中加入1 ml 75%的乙醇（用rnase-free水配制），溫和震蕩離心管，懸浮沉淀； 4℃ 8，000 rpm離心2 min，棄上清；
6. 室溫放置10 min晾干沉淀；
7. 沉淀中加入20μl rnase-free ddh2o，輕彈管壁，以充分溶解rna，-70℃保存；
8. 用1%的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行檢測，用eb染色并照相。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1. rna提取結(jié)果
依照trizol 試劑盒方法，提出的rna較少，此部分未以圖或數(shù)據(jù)顯示。
2. rna后電泳結(jié)果
如圖1. 其中9a為本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由圖可知rna條帶非常模糊，拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重，幾乎無法分清具體條帶，亮度較大。點(diǎn)樣孔附近的紅色部分為雜質(zhì)，在提取過程中并未很好除去。
圖1. rna提取跑膠結(jié)果。其中1泳道為樣品marker，9a泳道為本小組rna樣品。與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照可見條帶模糊，拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重。
六、分析與討論
1. rna的提取
產(chǎn)量并不多，可能是因裂解樣品不充分或rna沉淀未完全溶解所致。在實(shí)驗(yàn)過程中，由于對(duì)操作時(shí)間的掌握不熟練、操作技巧不完善，留上清與棄上清時(shí)令rna損失了部分，使最終rna產(chǎn)量不理想。
2. rna電泳結(jié)果
有eb存在時(shí)，電泳后28s rrna和18s rrna在紫外燈下應(yīng)看得很清楚，另出現(xiàn)條由trna，5.8s rrna和5s rrna組成的較模糊、遷移較快的帶。如果
rna沒有降解，則28s rrna的亮度應(yīng)為18s rrna的2倍，且這兩條帶都無彌散現(xiàn)象發(fā)生。由圖1. 9a可知，rna拖尾現(xiàn)象嚴(yán)重，說明rna已大部分被降解；此外點(diǎn)樣孔附近出現(xiàn)紅色部分雜質(zhì)，分析可能有并未除盡的蛋白質(zhì)，同樣影響rna電泳結(jié)果。
在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，本小組成員未嚴(yán)格戴上口罩并勤換手套，這可能使外源
rnaase進(jìn)入樣品，導(dǎo)致其降解嚴(yán)重。另外，提取出rna后本小組未立即將樣品放入-70℃保存，也為導(dǎo)致結(jié)果不理想的重要原因之一。在最初用氯仿萃取分層的過程中，由于水相吸取過多，摻雜入部分蛋白質(zhì)雜質(zhì)而未于后續(xù)純化步驟除盡，rna條帶拖尾嚴(yán)重可能還受該蛋白質(zhì)影響。
七、總結(jié)：
本次試驗(yàn)rna提取非常失敗，從跑膠結(jié)果可見其降解嚴(yán)重。雖然大實(shí)驗(yàn)無法避免試劑交叉污染的可能性，且電泳用膠的質(zhì)量也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，但從圖
1. 2a，3a，2b等條帶較為清晰的小組實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，瓊脂糖凝膠質(zhì)量以及試劑對(duì)結(jié)果干擾不大。那么本小組成員在提取過程中的操作一定出現(xiàn)了很大失誤。首先口罩、手套應(yīng)該嚴(yán)格按規(guī)定佩戴，提取過程對(duì)移液槍等儀器使用需謹(jǐn)慎仔細(xì)，盡量避免混入雜質(zhì)。其次為排除部分雜質(zhì)影響可對(duì)rna樣品用紫外線分光光度計(jì)測定吸光值檢驗(yàn)，將有助于結(jié)果分析。最后，細(xì)節(jié)決定成敗，我們應(yīng)汲取教訓(xùn)避免接下來的實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)類似問題。
實(shí)驗(yàn)二 第1鏈cdna的合成和模板的驗(yàn)證
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
1. 掌握第1鏈cdna的合成方法和步驟
二、實(shí)驗(yàn)原理
真核生物基因多為斷裂基因，編碼區(qū)不連續(xù)，需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工才能成為成熟mrna。以真核成熟mrna為模板合成cdna，進(jìn)而獲得有連續(xù)氨基酸編碼的dna序列，無需轉(zhuǎn)錄后加工，即可在原核細(xì)胞中表達(dá)。
真核生物的mrna都有polya尾巴。引物：oligo dt（12-18個(gè)t）。莫洛尼
氏鼠白血病毒逆轉(zhuǎn)錄酶（m-mlv ）以單鏈rna為模板，在引物的引發(fā)下合成與模板互補(bǔ)的dna鏈（cdna）。
mrna 反轉(zhuǎn)錄生成的cdna可作為pcr的模板進(jìn)行擴(kuò)增稱為rt-pcr，rt-pcr比northern雜交更靈敏，對(duì)rna的質(zhì)量要求較低，操作簡便，它是在轉(zhuǎn)錄水平上檢測基因時(shí)空表達(dá)的常用方法。
三、實(shí)驗(yàn)材料
1. 材料
徐薯18葉片rna樣品
2. 試劑
① dntp mi_ture（10 mm each）；
② oligo (dt) primer (10 μm)；
③ total rna；
④ rnase free ddh2o；
⑤ m-mlv 反轉(zhuǎn)錄酶；
⑥ 5×first-strand buffer；
⑦ 0.1 m dtt；
⑧ ribonuclease inhibitor (40 u/μl)
3. 儀器
10μl 和100μl 的移液槍、0.5ml的ep管、pcr儀等
四、實(shí)驗(yàn)方法
1. 在rnase free microtube 管中配制下列混合液：
dntp mi_ture（10 mm each）1 μl
_oligo (dt) primer (10 μm) 4 μl
total rna2 μl
